产品介绍
BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一——BCA 法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于1mM,β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。
产品特色
· 方便快捷 标准品室温稳定,无需稀释,无需分装冻存;
· 线性相关好 标准曲线线性好,表现优于国内外同类产品;
· 设定合理 标准品设计浓度1 µg/µL,方便计算;设定线性范围25-1000 µg/mL,线性表现更优(非工作液实际检测范围);
· 灵敏度高 检测浓度下限达25 µg/mL,最小检测限达到 0.5 µg;
· 兼容性好 可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的 Tween20、60、80。
操作步骤
1. 标准孔溶液配制: 取一块酶标板,按照下表加入试剂
2. 样本溶液稀释:估计待测样本浓度,做数个稀释,以保证待测孔蛋白含量落入标准曲线检测范围内。将待测样本原液(可选)和稀释后的样本加入空白孔中;
3. 工作液配制:根据标准孔的数量,按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B(50:1)配制适量 BCA 工作液,充分混匀后,每孔加入200 μL BCA 工作液;2. 样本溶液稀释:估计待测样本浓度,做数个稀释,以保证待测孔蛋白含量落入标准曲线检测范围内。将待测样本原液(可选)和稀释后的样本加入空白孔中;
4. 孵育、记录数据:轻晃酶标板20s,37℃或60℃放置 30 分钟后,测定562nm的吸光度值并记录;
5. 绘制标准曲线:以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线,检查R2值是否达到要求;
6. 计算样本蛋白含量:根据待测样本吸光度值计算样本孔蛋白含量(μg),除以样品稀释液总体积(20μL), 乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度(单位:μg / μL)。
保存条件
常温运输,避光保存,有效期2年。
注意事项
1. 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所 以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定宜每次都做标准曲线;
2. 如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定, 但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相 应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少;
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用。