产品介绍
TRzol 试剂是直接从细胞或组织中提取总 RNA 的试剂。它在破碎和裂解细胞时能保持 RNA 的完整性。
加入氯仿后离心,样品分成水样层、中间层和有机层。RNA 存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA 可以通过异丙醇沉淀来回收。
重要提示
有毒物接触皮肤或者不慎吞服,会导致灼伤。一旦接触皮肤后立即以大量的洗涤剂和清水清洗。若感不适,看医生并寻求苯酚和其他成分的正确治疗方案。
保存条件
TRzol 在室温下能稳定保存 12 个月。尽管如此,为达到最佳效果,我们建议保存在 2-8℃下。
注意事项
1. 从少量的组织(1~10mg)或细胞(102-104 个)中分离 RNA 样品:往组织或细胞中加入 800µl TRzol。待样品裂解后,加入氯仿并进行步骤 2 中的抽提操作。
在用异丙醇沉淀 RNA 之前,加入 5~10μg 无RNA 酶的 glycogen 作为水样层的载体。为降低其黏度在加入氯仿前用 26 号注射器抽吸两次以切断基因组 DNA。
Glycogen会留在水样层中并和 RNA 共析出。在浓缩到 4mg/ml 之前它不会抑制逆转录反应第一链的合成也不会抑制 PCR。
2. 在匀浆化后和加入氯仿之前,样品可以在-60℃或者-70℃保存至少一个月。将 RNA 沉淀溶于 75%的乙醇在 2-8℃至少可以保存一周,在-5℃ — -20℃下至少可保存一年。
3. 用 TRzol 抽提 RNA 时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无例外,室温保持在 15~30℃的条件下。