产品简介
本产品适用于 SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份 为 SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质带有大量的负电荷,这时 蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分 子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的 二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚 单位), 电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结 束的时间。
使用方法
1、 请按每 40 微升蛋白样品加入 10 微升上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白样 品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、 混匀后,100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。
3、 冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。
保存条件
-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融。有效期 12 个月。
注意事项
1、 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右,胶浓度为 12%时, 约在 20kd 左右,胶浓度为 15%时,大概在 10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。
2、 本试剂因含 DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可 能会呈现深棕色,不影响产品使用。